Agradezco a Dgenes por su compromiso con los pacientes de Lyme.
Webinar La enfemedad de Lyme 18.07.2021 (al punto 2:19:58)
Mi agradecimiento y reconocimiento al Dr. Armin Schwarzbach, titular de Armin Lab, por sus conocimientos, su constante innovacion en tècnicas de diagnostico para la enfermedad de Lyme y en particular su compromiso y orientación a los pacientes, que siempre fueron muy valiosos para mi.
De imprescindible lectura y/o escucha en inglés (Subtitulado en castellano por Andrea Vázquez McCoy)
Resumen y transcripción
Armin Schwarzbach PD;PhD
EliSpot: Las celulas T juegan un papel esencial en las infecciones, reacciones alergicas, cancer, rechazo de transplantes y enfermedades autoinmunes.
"La cuantificaciòn de la liberaciòn de interferòn- gamma (IFN-y) de una sola cèlula, para evaluar las respuestas inmunitarias celular mediante el ensayo de inmunoespot ligado a enzimas (Elispot),es una tecnica muy valiosa en inmunologia" Handbook of EliSpot: Methods and Protocols, Editor Kalyuzhny Alexander, julio 2018.
En el 2011 la FDA de EEUU aprueba la tecnica EliSpot /T- Cell- Spot/anàlisis de liberaciòn de interferòn gamma(IGRA) para Tuberculosis. En sus directrices y recomendaciones afirman que "un resultado positivo sugiere que una infeccion es probable y un resultado negativo sugiere que una infecciòn es improbable. Los resultados pueden estar disponibles en 24 hs.
Los analisis EliSpot proporcionan pruebas sólidas y con una alta reproducibilidad de los datos y pueden repetirse para obtener informaciòn adicional. El EliSpot està certificado por la CE y registrado y validado por la IVD. Estas certificaciones son importantes porque la UE ha aprobado unas directrices por las cuàles a partir del año que viene no se permitirá realizar análisis que no tengan estas certificaciones.
Dos ensayos se complementan para lograr entender la inmunidad mediada de las células T en vivo (EliSpot + recuento de células CD57). El EliSpot o IGRA refleja la actividad actual de las células T contra bacterias o viruses durante un máximo de 8 semanas, porque es una respuesta basada en los linfocitos de la sangre y los linfocitos sobreviven un máximo de 8 semanas en el torrente sanguíneo.
Al mirar los resultados de un analisis es muy importante también tener en cuenta los resultados de LFA-1. Un resultado positivo puede indicar que el paciente sufre de la enfermedad de Lyme y además una enfermedad autoinmune como colagenosis, artritis reumatoides o vasculitis. Si el resultado de LFA-1 es positivo se deberían mirar las ANA's, los anticuerpos CCP y los ANCA.
El Full antigen es de la banda de referencia B31 (Borrelia Burgdorferi sensu stricto) y causa mucho dolor muscolar y de articulaciones. Es la cepa más común en América - EEUU aunque también la tenemos en Europa. Y la mezcla de OSP es una mezcla de B. Burgdorferi s. stricto, Borrelia Afzelii y Borrelia Garinii y el paciente tiene un resultado de +16. La Garinii causa neuroborreliosis así que estos pacientes sufren de fatiga crónica y de síntomas neurológicos (difficultades cognitivas, problemas de memoria, ardor en manos y pies, entumecimiento..) por los tanto tienen muchos problemas de sensibilidad y neuropatías. Algunos pacientes pueden tener síntomas parecidos a la Esclerosis múltiple.
El EliSpot puede ayudar mientras se está en tratamiento con antibióticos o otro tipo de tratamientos porque los linfocitos sobreviven un máximo de 8 semanas en el torrente sanguíneo mientras que los anticuerpos pueden permanecer durante meses o incluso años por lo que no son tan utiles.
La respuesta inmune de las células T tiene una reacción corta y por ello podemos utilizar el EliSpot para monitorizar a los pacientes. Al igual que hacemos en pacientes de cáncer utilizando antígenos de cáncer.
El EliSpot se puede utiliza para monitorizar a pacientes mientras que los análisis de anticuerpos no servirían para este fin y tambien muestra si un tratamiento es efectivo o no. Si el tratamiento es efectivo, el EliSpot debería negativizarse. Si el tratamiento no es efectivo, el resultado del EliSpot seguiría positivo.
Lo definieron como una análisis que supone una revolución para la enfermedad de Lyme. Ahora tenemos otros análisis como el Phage pero no está certificado por la CE ni está registrado y validado por la IVD. Si no consigue esas certificaciones, la UE lo prohibirá. Los estándares para el EliSpot son muy elevados. Muchos laboratorios están utilizando este método porque ahora existe el EliSpot también para COVID. La sensibilidad es alrededor de 84-85% y la especificidad es de 94%. No hay ningún análisis en el mundo que tenga una sensibilidad del 100% ni una especificidad del 100%.
Se deben mirar también las células asesinas - CD56 y CD57.
En un estudio (puede verlo en el video Youtube linkeado al minuto 2:28:46) presentado en 2017 por el Dr. Jack Lambert, especialista en SIDA y SARS Cov2 de la Universidad de Mater de Dublin, Irlanda comparó el Western Blot de IgeneX con el EliSpot de ArminLabs en sus pacientes y también comparó el ELISA de otro laboratorio con el EliSpot de ArminLabs. Encontró que el 85% de sus pacientes con Lyme Crónico dieron positivo en el EliSpot mientras que solo el 15% dieron positivo en el Western Blot. Por lo tanto, el EliSpot es 70% más fiable que cualquier Western Blot. Comparando el EliSpot al C6 ELISA encontró que el 32% de los pacientes dieron positivo en el C6 ELISA, más que en el Western Blot, pero 84% dieron positivo en el EliSpot. Esto reproduce exactamente los datos anteriores: 84-85-86%. También comparó el análisis a dos niveles (ELISA y Western Blot) de un laboratorio estándar con el EliSpot y volvió a salir un 86% de positivos en el EliSpot vs un 14% en el análisis a dos niveles.
El ELISA y el C6 ELISA tienen una sensibilidad y una sensitividad muy bajas.
Así que para mi no tiene sentido realizar análisis ELISA.
El SeraSpot IgM es un Western Blot moderno. Tiene una especificidad mayor aunque la sensibilidad sigue siendo baja. Es un Western Blot que hemos llamado Microarray. El antiguo Western Blot dejamos de utilizar en Alemania en los años 80-90. Lo que ofrecemos ahora es el TickPlex Basic. Volveré más tarde a hablar sobre ello porque ahora sabemos que la Borrelia desarrolla muchas formas persistentes o cuerpos redondos. Y este análisis, al igual que el EliSpot, supone una revolución en el diagnóstico de la enfermedad de Lyme. El mejor análisis de anticuerpos es el TickPlex Basic con una alta sensibilidad y una alta especificidad. Así que lo recomiendo absolutamente para la enfermedad de Lyme Crónico. El Western Blot ya no tiene mucho sentido. El PCR es muy poco sensible. He realizado muchos análisis de PCR y creo que en 15 años solamente dos de ellos fueron positivos. El EliSpot es tecnología de vanguardia en los análisis de inmunidad celular. Análisis de cultivo de Borrelia es difícil de realizar porque hay un alto riesgo de contaminación.
Desarrollamos EliSpot de varias coinfecciones de bacteria, virus, hongos, COVID-19 y Borrelia Miyamotoi. (Ver en el video al punto 2:23:00)
El iSpot de Borrelia o el iSpot de Covid es una combinación entre la técnica de liberación de interferon gama (el EliSpot - así que el EliSpot está incluido en este análisis) y la interleuquina 2. La IL2 es una citoquina que muestra infección pasada. (Ver en el video al punto 2:33:49) Ahora tenemos la oportunidad de realizar una combinación de análisis. En el primer recuadro vemos un resultado negativo en el análisis de interferon gama (EliSpot) y positivo en el de IL-2. Esto significa infección por Borrelia latente o curada y en este caso no indicaría ningún tratamiento, solo monitorización de sintomas siempre que persistan. En el segundo recuadro podemos ver una segunda posibilidad: interleuquina 2 positiva e interferon gama positivo. Esto indicaría una infección persistente por Borrelia. Se recomendaría una verificación del diagnóstico y una monitorización del paciente siempre que persistan sintomas. No se olviden que estos son solo análisis que no demuestran la presencia de una infección. Para demonstrar una infección por Borrelia se necesita aislar a la Borrelia Burgdorferi en biopsias de articulaciones y después se debe intentar cultivar. Así que la única forma que tenemos hoy en día es realizar el nuevo y moderno iSpot de Borrelia o si no, mínimo, el EliSpot de Borrelia. El siguiente recuadro muestra una tercera posibilidad: Interferon Gama positivo e IL-2 negativo. Esto se relacciona con el EliSpot tradicional. Significa que el paciente tiene una infección actual por Borrelia Burgdorferi y una indicación de que habría que pautar tratamiento y un seguimiento tras el tratamiento. El último recuadro muestra la posibilidad de que ambos resultados den negativo: IL2 e Interferon gama. También hay pacientes que dan negativo - solo un 80-85% dan positivo. El resto a lo mejor tienen otras infecciones - coinfecciones y no sufren la Enfermedad de Lyme.
Si ambos análisis son negativos se entiende que no hay infección por Borrelia y que no hace falta tratamiento. El iSpot es una herramienta útil. No demuestra una infección pero es una herramienta muy útil a la hora de tomar decisiones sobre la necesidad de pautar un tratamiento o no.
Si el paciente tiene un resultado en el iSpot que muestra una infección activa, trate el Lyme. Si da negativo, entonces ¿por qué tratar el Lyme? Habrá que mirar otras posibles causas de los síntomas. Otras infecciones Coinfecciones o infecciones oportunistas como virus, parásitos, hongos y mohos o quizás alguna enfermedades raras.
Este es un ejemplo de resultado de análisis iSpot. El resultado de interferon gamma (EliSpot) es positivo mientras que el resultado de IL 2 es negativo. Si el paciente presenta síntomas, se le tiene que tratar.
(Ver video al punto 2:36:15) Quiero mostrar 3 o 4 diapositivas sobre virus. Las infecciones virales pueden imitar los síntomas de una infección por Borrelia. El CMV es un virus muy común y puede encontrarse en cualquier parte del cuerpo. Es un enterovirus por lo que inflama el intestino. Es un virus cardiotrópico por lo que afecta al ritmo cardiaco. Es un virus neurovirulento por lo que inflama el cerebro, inflama las articulaciones y causa artritis. Por lo tanto, este virus imita muchos de los sintomas de Lyme por lo que hay que tener cuidado. No todo es Lyme después de la picadura de una garrapata. También puede estar sufriendo una reactivación del virus CMV. Este es un virus típico del SFC. Utiliza los mitocondria, al igual que el virus de COVID para respirar. Te chupa la energia y tus ATP. También tenemos el virus del Epstein Barr, que puede acompañar al CMV. También sabemos que el CMV puede causar cáncer como linfoma no hodkin. También puede causar miocarditis; problemas en el ritmo cardiaco como he mencionado anteriormente. También produce dolor de garganta y a veces los pacientes presentan ganglios linfáticos cervicales inflamados. No es Lyme. Es altamente contagioso. Se encuentra en la orina, en la saliva y se transmiten entre los miembros de una familia. Y lo que hemos aprendido del SarsCOV2 es que tenemos tres "i": infección, disfución inmunológica causada por el virus e Inflamación. Sabemos que no solo el SarsCov2, si no que también el CMV, causa trastornos trombóticos. Así que todos estos virus afectan al sistema de coagulación. Quizás también el Lyme afecta a la coagulación. Sabemos que la Bartonella afecta a la coagulación pero no sabemos si las otras coinfecciones afectan también. ¿Cómo saber si un paciente tiene una infección por CMV? Tenemos el EliSpot - antígeno lítico. Olvídense del análisis de anticuerpos ya que no son muy sensibles. El EliSpot es entre 20 y 200 veces más sensible que el análisis de anticuerpos IgG/IgM. Este es un resultado de EliSpot de EBV positivo y un EliSpot de CMV positivo. (Ver video al punto 2:39:22) Es una infección doble y ambos virus están activos. En este caso no es Lyme, hay que tratar los virus. Los antibióticos no harán nada. Ahora quiero hablar sobre el Virus Coxsackie que también he encontrado a menudo. Es un virus del estómago muy contagioso. Similar a infección por SarsCov2, se contagia a través de fluidos corporales, núcleo de gota, contaminación fecal-oral.. Muchos de estos pacientes tienen ampollas en la boca. Empieza en el intestino, empieza en la boca, durante la infancia. El problema es que se extiende desde el intestino a todas las partes del cuerpo causando fiebre, sarpullidos, dolor de garganta, diarrea, tos, fatiga (es un virus tipico que causa fatiga), problemas en el intestino, permeabilidad intestinal, intolerancias alientarias.. Y el problema principal de este virus Coxsackie - quizàs conozcan el virus de la poleomielitis - es del mismo grupo de enteroviruses que el Coxsackie. Este virus causa tambièn Fatiga Crònica, ELA, Demencia, Alzheimer. Aconsejo a los padres de niños con diagnóstico de diabetes mellitus tipo 1, realizar análisis de Cosaxckie a sus hijos. Cuanto antes se encuentre la infección, antes se puede tratar. Sabemos que este virus destruye el páncreas y destruye la producción de insulina. Muchos pacientes empiezan con síntomas de diarrea. Es un virus que también puede causar problemas autoinmunes, miocarditis, problemas cardiacos, hepatitis... Y no es la enfermedad de Lyme. Este virus puede causar exactamente los mismos síntomas que la enfermedad de Lyme. Creo que muchos pacientes creen que sufren la enfermedad de Lyme pero tienen otros problemas. Hace falta una visión global de todas las infecciones para saber qué le pasa al paciente. No todo es Lyme. Sé que el Lyme es un enorme problema en el mundo pero en mi opinión, hoy en día, no es el problema principal. Tenemos cada vez más evidencia de que este virus puede jugar un papel en la demencia y ELA. Sí, es verdad que la Profesora Embers ha encontrado B. Burgdorferi en el cerebro de pacientes con Esclerosis múltiple. Alan McDonald descubrió lo mismo hace 20 años por lo que no es algo sorprendente.
Todos estos virus y bacterias pueden inflamar nuestros cerebros, destruir partes de nuestro cerebro y generar lesiones en la sustancia blanca del cerebro. ¿Cómo realizar análisis del virus Coxsackie? Realizando un análisis de anticuerpos IgA. No de IgM. Si realiza IgM está perdido. No es un buen marcador para detectar esta infección local inflamatoria. Necesitamos realizar anticuerpos IgA. Los IgA tienen una vida media corta de dos semanas. El 20% de estos anticuerpos los produce la mucosa. Ahora sabemos por el SarsCov2 - y lo mismo pasa con el virus de la gripe - que en la mucosa de la tos(?) hay anticuerpos IgA. También se producen muchos anticuerpos IgA después de las vacunaciones. La vacunas de Biontech y Moderna están haciendo esto porque el sistema inmune produce anticuerpos IgA. Aunque esto no es normal porque estos anticuerpos tienen una vida media de dos semanas. A las dos semanas debería desaparecer el 50%, si no desaparecen, tiene una infección local inflamatoria persistente en el cuerpo. Y esto se detecta analizando anticuerpos IgA. ¿Por qué son los IgA tan importantes? Los IgA son los únicos anticuerpos que se producen en un 20% en las membranas mucosas - las IgA secretoras. Este es el único anticuerpo que sirve. Olvídense de los IgG o los IgM. Los IgG pueden ayudar a nivel sistémico pero los IgA son los anticuerpos clave. Este es un ejemplo para mostraros cómo trabajamos hoy en día. Es un resultado de un análisis de Chlamydia IgA y Coxsackie. Chlamydia Pneumoniae IgA positivo y Coxsackie 1:100. Este es un resultado muy alto. Habría que tratar el intestino, la disfunción inmune y la inflamación. No se deberían usar antibióticos aunque viendo que también hay infección por Chlamydia se podría usar una terapia antiviral a la vez que antibióticos. Esto es lo que necesitamos aprender. No existe un paciente de Lyme que no tenga otras infecciones. Y yo diría que el 99,9% de ellas son virus. ¿Y ahora qué? ¿Qué hacer? Los sintomas no son específicos de la enfermedad de Lyme, se solapan con otras infecciones y es por esto que hace años diseñé una lista de síntomas. Usando esta lista de síntomas podemos hacernos una idea de qué coinfecciones puede estar sufriendo el paciente. (Ver video al punto 2:44:36) Cuanto más sintomas tenga de una infección, más alta es la probabilidad de que sufra esta infección y de que los resultados de los análisis den positivo. No hace falta realizar todos los análisis de coinfecciones, no es necesario. Primero revise los síntomas y lleve a cabo un buen diagnóstico clinico. Así que necesitamos pensar en eso. Rellenar la lista de sintomas y enviarla para que les ayudemos a seleccionar los análisis es gratis.
TickPlex - el último análisis del que quiero hablar. Este análisis es un gran avance, sobretodo el TickPlex Basic. Hace 6-7 años trabajé con la Profesora Gilbert en un proyecto de la Unión Europea. Tuvimos colaboradores también de Barcelona y Lisboa. Trabajamos juntos en este proyecto con mucho éxito. Entre todos (8 socios) conseguimos 4 millones de euros y desarrollamos el primer sistema de análisis con biochip. No pudo pasar a producción en masa pero aún así fue un enorme descubrimiento para nosotros porque encontramos el 80% de los pacientes de Lyme Crónico tienen formas pleomórficas - cuerpos redondos - de la bacteria intracelulares. También biofilm. Todos conocemos ya los biofilm. En la imagen del a derecha. (Ver el video al punto 2:46:33) "encontramos que la forma pleomórfica de la B. Burgdorferi debe tenerse en cuenta como clínicamente relevante e influir en el desarrollo de nuevos diagnósticos y protocolos" Esto se publicó. Publicamos dos articulos en 2015. Así que decidimos desarrollar un análisis de anticuerpos contra esta forma pleomórfica de cuerpos redondos. Y la profesora Gilbert desarrolló este análisis que está certificado por la CE y registrado por IVD. Y el gobierno Finlandes financió este proyecto. ¿Por qué? Porque la profesora Gilbert y su equipo, usando el TickPlex, encontraron la forma persistente de la bacteria en el 80% de muestras de suero caracterizadas. Así que con el típico Western Blot o SeraSpot no se detectan muchos de los casos y el ELISA no sirve de nada. Los resultados de la investigación número 2 fueron que 3 de cada 4 pacientes negativos para la CDC, dieron positivo al buscar anticuerpos contra la forma persistente de la Borrelia. 75% de los pacientes que según la CDC no tiene Lyme, tienen anticuerpos contra la forma persistente de la Borrelia. Así que, como pueden ver, el número de casos que no se diagnostican, incluso en EEUU, son muchos. Pero esto no significa que todos los pacientes con esta bacteria tienen síntomas. Muchos pacientes controlan la infección. Pero si en algún momento su sistema inmune se debilita, todas las infecciones pueden activarse. Por lo tanto, el sistema inmune juega un papel clave en todas estas infecciones. Los resultados de la investigación número 3 fueron que el 95% de los pacientes de Post Lyme - una palabra que no tolero - tenían anticuerpos positivos contra la forma persistente de la Borrelia. ¡95%! Quizás el 5% tenían Post Lyme, aunque no se ha demonstrado la existencia de Post Lyme. Pero sí que se ha demonstrado la existencia de la Enfermedad de Lyme persistente crónica. Y el resultado de la investigación número 4 se corresponde con lo que he observado yo en mi laboratorio durante los últimos años y que también está publicado - estudio basado en la evidencia - yo no soy el autor de esta publicación. Analizaron las coinfecciones e infecciones oportunistas más comunes - Babesia Microti, Bartonella Henselae, Erlichia, Ricketsia y demás.. Chlamydia.. Y lo que encontraron fue que el 85% de los pacientes tenían varias infecciones.
Así que pacientes que solo tengan Borrelia/Lyme son el 15% o menos. En mi opinión es posible que existan pacientes con solo Borrelia, pero no son la mayoría. Por último quiero mostrarles un ejemplo de informe de análisis. (Ver el video al punto 2:50:15) Estos resultados muestran claramente anticuerpos IgM contra la forma persistente (cuerpos redondos) de la Borrelia. Diría que con estos anticuerpos IgM postivos necesita tratamiento, quizás antibióticos. Siempre que no tenga otras coinfecciones o virus. Este es un ejemplo de un resultado del TickPlex Plus - un análisis que analiza el 85% de coinfecciones de las que hablámos antes. En este ejemplo vemos un resultado positivo en IgM contra la Bartonella Henselae. Este análisis utiliza la técnica ELISA pero es mucho más sensible que todos los ELISA IFA. Yo también hago ELISA IFA en el laboratorio pero no son técnicas sensibles. Volviendo a este paciente - de momento vemos que tiene una doble infección: Borrelia con forma persistente y Bartonella. Pero esto no es todo. Vemos que también tiene EBV IgM. Entonces el paciente tiene un virus y dos bacterías. ¿Cómo tratar? ¿Qué hacer? Yo no utilizaría antibióticos. Siempre prefiero tratar primero el virus, la disfunción inmune y la inflamación. Y el paciente mejorará. Los antibióticos le empeorarán - causarán una inmunosupresión celular que acentuará la actividad del virus. Esto está claro.
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